PCR | RT-PCR 的原理及应用
生物的东西必须要主动去了解，否则视野容易受到限制，尤其是分子生物学的核心技术。 The Complete Guide to PCR (How it Works, Primer Design, and Running Reactions) 目的：从DNA双链中扩增出感兴趣的区段，用于后续的研究。 原理：DNA结构，双螺旋，AT、GC配对；DNA双链在临界温度会解链，退火后又会恢复；引物，DNA复制的起点，之所以需要引物是因为在DNA合成中DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已有的DNA链上。 操作核心： wiki上很全面 1. 引物设计，会考虑GC含量，决定退火温度； 2. 变性、退火和延伸； PCR Applications―Top Seven Categories Gene expression Genotyping (detection) Cloning Mutagenesis Methylation analysis Sequencing Medical, forensic, and applied sciences 问题： 1.真核生物的组蛋白会影响PCR吗？ 2.为什么需要前后引物，前后引物是如何p出指定区段的？ 逆转录PCR，就是PCR的一个常规应用，我也跑过，见过庞大的机器，也是先设计引物，然后提cDNA，定量。 一条RNA链被逆转录成为互补DNA